1.采血时间

研究表明，细菌大量入血的时间为患者寒颤发热前1小时，因此最佳的采血时间在寒颤和发热初起前30分钟-1小时，应同时（或间隔30分钟-1小时）采集2-3套血培养，只有在怀疑患者有感染性心内膜炎或其它血管内感染（如导管相关性感染）时，才有必要间隔较长时间多次采集血培养。
   尽可能在抗菌药物使用前采血，对已经使用抗菌药物的患者，最好在下次用药前采集。

2.血培养采血量

对于成人，采血量在2-30 ml时致病菌的检测与血量成正比，虽然采血量增长至40 ml（甚至更高）时血培养阳性率仍在提高，但已经不再与采血量成正比，因此我们建议每瓶采血量8-10ml。对于婴幼儿，采血量不应超过患儿总血量的1%，每瓶不少于2ml。

3.血标本在需氧瓶和厌氧瓶间的分配

通常情况下如采用蝶翼针采集或直针真空采血，需氧瓶应为第一瓶；如采用注射器采集时，厌氧瓶应为第一瓶。如果采血量低于推荐血量，则应将血标本先注入需氧瓶，再将剩余血液注入厌氧瓶（不少于5ml）。如果仅做需氧培养，每套培养应使用2个需氧瓶并保证有足够的血量。

4.皮肤消毒以避免污染

为减少皮肤菌群对血培养的污染，应对静脉穿刺点进行常规消毒。

5.血培养采集

血标本采集应严格遵守无菌操作，从静脉采血。留置导管血通常比静脉穿刺血培养污染率高。若分析导管相关性感染，应在采集导管血的同时，静脉穿刺采集外周血进行对比。如果从静脉管道采血，不需要弃去开始段的血液，也不需要使用生理盐水冲洗管道以消除抗凝剂，因为其抗菌作用通常可以被培养基有效稀释消除。 
   静脉穿刺点选定后，去除血培养瓶的瓶帽，使用70%异丙醇消毒待干，然后再对静脉穿刺点消毒，先使用70%异丙醇消毒，自然干燥后，再使用相应消毒剂作用足够时间。采血人员除非佩戴无菌手套，在患者皮肤消毒后不得触碰其静脉。血液注入血培养瓶前更换针头对于污染率的减少作用甚微，且易引发针刺伤。血标本注入血培养瓶后应轻轻翻转数次，以免凝血。

6.血培养的运输

血培养瓶应在2小时内送至实验室，延迟上机会延缓甚至阻碍病原菌生长。培养瓶在室温仅能存放数小时。切忌将培养瓶冷藏或冷冻，冷藏或冷冻会导致部分病原菌死亡，冷冻可能导致培养瓶破裂。（重症医学科王凤莲）